Низкая скорость центрифуга
Описание
Технические параметры
A низкоскоростная центрифугавращение, чтобы создать центробежную силу, которая отделяет компоненты различной плотности в образце. Во время разделения клеток клетки, фрагменты клеток и другие биомолекулы разделяются на разные места центробежной силой, в зависимости от их массы и плотности. В частности, когда пробирная трубка вращается на высокой скорости внутри центрифужного ротора, центробежная сила на различных компонентах смеси пропорциональна их массе, а также зависит от скорости и радиуса вращения. Большие клетки или частицы бросаются в нижнюю часть центрифужной трубки, в то время как меньшие компоненты остаются в верхнем слое. Этот принцип разделения, основанный на плотности и массе, делает низкоскоростные центрифуги идеальным инструментом для разделения клеток.
Процедура низкоскоростной центрифуги при разделении клеток
| ◇Приготовление образца: Во -первых, вам нужно подготовить образец клеток для разделения. Это обычно включает в себя клеточные культуры, образцы крови или другие биологические образцы, содержащие клетки. Убедитесь, что образец был должным образом предварительно обработан до центрифугирования, такой как разбавление, пищеварение или фильтрация. ◇ Выберите правую центрифужную трубку: Выберите правую центрифужную трубку в соответствии с объемом образца и требуемой центробежной силы.Низкая скорость центрифугаS обычно поддерживают различные центрифужные трубки, такие как 15 мл, 50 мл или 100 мл. Убедитесь, что центробежная трубка имеет хорошего качества и запечатана, чтобы избежать утечки во время центробежного процесса. ◇Балансирующие образцы: Перед тем, как поместить образцы в центрифугу, вам необходимо убедиться, что образцы во всех пробирках центрифуги были равны или одинаковой массе. Это можно сделать, взвешивая массу выборки в каждой центрифужной трубе. Баланс выборки необходим для предотвращения создания центрифуги и шума во время работы. |
|
|
|
◇ Установите центробежные параметры: Согласно экспериментальным требованиям, установите соответствующую центробежную скорость и время. Диапазон скорости низкоскоростных центрифуг обычно составляет от 300 об / мин, 000 об / мин, и время можно скорректировать в соответствии с типом образца и желаемого эффекта разделения. ◇ Начните центрифугу: Поместите сбалансированную центрифужную трубку в ротор центрифуги и закройте покров центрифуги. Затем запустите центрифугу и центрифугу в соответствии с установленными параметрами. Во время процесса центрифугирования обратите внимание на состояние контроля центрифуги, чтобы гарантировать, что нет ненормальной вибрации или шума. ◇ Соберите и обработайте образцы после разделения: После центрифугирования выключите центрифугу и подождите, пока она полностью остановится. Затем центрифужная трубка тщательно удаляется, а супернатант и осадок ячейки собираются в отдельные контейнеры с использованием соответствующего инструмента, такого как пипетка. В зависимости от потребностей эксперимента, осаждение клеток может быть дополнительно очищено, культивировано или проанализировано. |
Соображения низкоскоростной центрифуги при разделении клеток
● Выбор правильной центробежной скорости и времени: Выбор скорости и времени имеет решающее значение для эффективности разделения клеток. Слишком высокая скорость вращения может привести к разрыву клеток или повреждению, в то время как слишком длительное время может привести к агрегации ячейки или неполному осаждению. Следовательно, выбор центробежных параметров следует учитывать в соответствии с типом, размером и плотностью клеток.
● Обеспечьте баланс образца: Баланс выборки является ключом, чтобы предотвратить создание центрифуги во время работы. При размещении образцов необходимо обеспечить, чтобы образцы во всех пробирках центрифуги были равны или одинаковой массе. Если существует большая разница в качестве выборки, в более легкую центрифужную трубку можно добавить соответствующее количество буфера или нормального физиологического раствора для достижения баланса.
● Выберите правую центрифужную трубку: Качество и стеснение центрифужной трубки также оказывают важное влияние на эффективность разделения клеток. Высококачественные центробежные трубки имеют хорошее уплотнение и коррозионную стойкость, что может эффективно предотвратить утечку и загрязнение образца. В то же время спецификация центробежной трубки также должна быть выбрана в соответствии с объемом образца и требуемой центробежной силой.
● Обратите внимание на техническое обслуживание и поддержание центрифуги: Регулярно очищать центробежную камеру и ротор центрифуги, чтобы предотвратить остаточное загрязнение образца. Протрите чистую во времени после использования, чтобы избежать коррозии, вызванной жидкостью. В то же время также необходимо регулярно проверять шнур питания и подключение и другие компоненты центрифуги, чтобы гарантировать, что они не повреждены и избегали угроз безопасности.
Применение низкоскоростной центрифуги в биотехнологии
● Обработка клеток в генетической инженерии: В генетической инженерии клетки часто должны быть культивированы, трансфицированы, скринированы и другие обработки. Низкоскоростные центрифуги могут быть использованы для таких этапов, как концентрация и промывание клеточных суспензий, а также сбор клеток после трансфекции. Благодаря центрифугированию можно удалить примеси и нетрансфицированные клетки в среде для культивирования клеток, а эффективность и чистота трансфекции генов можно улучшить.
● Очистка и выделение белка: В исследовании белка специфические белки должны быть очищены из сложных биологических образцов. Низкоскоростные центрифуги могут быть использованы для первоначального разъяснения растворов белка и удаления примесей, таких как клетки, нуклеиновые кислоты и т. Д. По центробежным обработке можно получить относительно чистый раствор белка, который обеспечивает основу для последующих стадий очистки.
● Выделение и очистку частиц вируса: Вирусные частицы обычно имеют определенную плотность и размер и могут быть разделены и очищены низкоскоростными центрифугами. Например, в исследованиях вирусологии вирусные частицы могут быть отделены от клеточных культур с использованием дифференциального центрифугирования. Этот метод использует преимущества различий в центробежных силах на разных скоростях, чтобы отделить вирусные частицы от других клеточных компонентов.
● Производство и контроль качества биологических препаратов: В процессе производства биологических препаратов часто используются центрифуги с низким скоростью для разъяснения жидкости клеточной культуры, удаления клеточного мусора и начального разделения лекарственных продуктов. Кроме того, в контроле качества лекарственных средств можно также использовать центрифуги с низкими скоростями для выявления ключевых показателей, таких как распределение по размерам и стабильность частиц лекарственного средства.
Применение низкоскоростной центрифуги в разделении частиц вируса
◇ Первичное разделение: Низкоскоростные центрифуги часто используются для первичного разделения частиц вируса. В процессе экстракции вируса большие частицы, такие как фрагменты клеток и примеси, могут быть удалены путем низкоскоростного центрифугирования, и можно получить относительно чистую суспензию вируса. Этот шаг облегчает последующие этапы очистки.
◇ Вирусное обогащение: В некоторых случаях низкоскоростные центрифуги могут также использоваться для обогащения вируса. Приспосабливая время и скорость центрифуги, частицы вируса могут быть осаждены в нижней части центрифужной трубки, чтобы можно было получить концентрированный образец вируса путем экстракции супернатанта. Тем не менее, следует отметить, что эффект обогащения низкоскоростных центрифуг относительно ограничен, и в случае, когда требуются вирусы высокой чистоты, обычно требуются другие методы очистки.

В сочетании с другими методами очистки
● Дифференциальный центробежный метод: Дифференциальный центробежный метод - это метод разделения частиц разных размеров и плотности с использованием различных скоростей и центробежных времен. Дифференциальное центрифугирование часто используется для дальнейшего удаления примесей и концентрации вируса во время очистки вируса. После удаления больших частиц, таких как органелл, путем низкоскоростной центрифугирования, частицы вируса осаждаются высокоскоростной центрифугированием.
● Метод центрифугирования градиента плотности: Метод центрифугирования градиента плотности - это использование среды различных плотностей для формирования градиента, так что частицы разных плотностей оседают к различным позициям в методе градиента. При очистке вируса центрифугирование градиента плотности часто используется для отделения частиц вируса от других примесей аналогичной плотности (таких как белки, нуклеиновые кислоты и т. Д.). Приготовление градиента плотности в центрифужной трубке заранее, а затем добавляя суспензию вируса на поверхность градиента для центрифугирования, частицы вируса будут оседать в определенном положении в градиенте с образованием зоны осаждения.
● Метод осадков: Метод осадков состоит в том, чтобы осадить частицы вируса путем добавления химических реагентов. Обычные осаждающие агенты включают сульфат аммония, полиэтиленгликоль (PEG) и т. Д. Метод осаждения может использоваться для дальнейшей очистки вируса. Регулируя концентрацию и значение pH осадного, частицы вируса могут быть селективно осаждены, чтобы удалить примеси.
● Метод фильтрации: Метод фильтрации - это метод отделения частиц вируса от других примесей с помощью гель -фильтрационной хроматографии. Хроматографический колонн гелевого фильтра отделяется в зависимости от размера частиц, и сначала большие молекулы вытекают из хроматографического колонны, и малые молекулы вытекают позже. Выбирая подходящие гелевые и хроматографические условия, частицы вируса могут быть эффективно отделены от других примесей.
● Электрофоретический метод: Электрофоретический метод - это использование действия электрического поля для создания заряженных частиц в методе миграции электрического поля. При очистке вируса электрофорез часто используется для отделения вирусных частиц от других заряженных примесей. Эффективное разделение и очистка частиц вируса могут быть достигнуты путем выбора подходящих условий электрофореза и среда.
горячая этикетка : Низкоскоростная центрифуга, Китай с низкой скоростью производители центрифуги, поставщики, фабрика
Предыдущая статья
Лаборатория три роллаСледующая статья
Лабораторная центрифужная машинаОтправить запрос













