Классическая колоночная хроматография

Классическая колонка хроматография, также известный как жидкость-твердая хроматография, является методикой разделения растворенных веществ, основанных на разнице в распределении между стационарной фазой (обычно твердым адсорбентом) и подвижной фазой (растворитель) . Основной принцип может быть обобщен следующим образом: с помощью фиксированной фазы, растворское решение, используется в компоненте, разделен на дискрецию, и затем в компоненте распределяется на дискрецию, и затем в компоненте распределяется на дискрецию, разделяемый в компоненте, разделяется на дискрецию, а затем в компоненте распределяется на дискрецию, и затем в компоненте распределяется на дискрецию, а затем в компоненте. Коэффициенты распределения между фиксированной фазой и мобильной фазой .

В колонке хроматографии стационарная фаза обычно состоит из пористых частиц (таких как силикагель, глинозем, активированный углерод и т. Д. Молекулы из стационарной фазы и ее выбор должен быть определен в соответствии с полярностью растворенного вещества и адсорбционными характеристиками адсорбента .

В процессе разделения смесь вводится в столбце, содержащую стационарную фазу . с потоком мобильной фазы, компоненты перемещаются вниз по колонке на разных скоростях из -за различной адсорбционной способности стационарной фазы ., более полярные компоненты обычно легко подчиняться, что со счетом, поэтому они замедляют, что они не подходят, что они не подходят, что они не подходят, что они не подходят, так что они не подходят для составы, так что они не подходят, что они не подходят, что они не подходят, что со счетом. Полярность легко увлечена подвижной фазой, а скорость движения быстрее . Таким образом, каждый компонент образует ряд цветовых полос в столбце для достижения разделения .

► Цель производного лечения
Основная цель дериватизации состоит в том, чтобы изменить физико -химические свойства аналитов, чтобы они были более подходящими для разделения и обнаружения с помощью хроматографии столбца . Специально, обработка производной может достичь следующих целей:

1) Улучшенная производительность обнаружения: введя функциональные группы, которые легко обнаружить, аналит генерирует более сильный сигнал на детекторе, повышая чувствительность и точность обнаружения .
2) Изменить молекулярную структуру или полярность: отрегулируйте полярность аналита, чтобы улучшить его разделение на колонке и уменьшить пиковое след и перекрытие .
3) Повышенная волатильность: для некоторых нелетующих аналитов дериватизация может улучшить их волатильность, облегчая их разделение и обнаружение в газовой хроматографии .
4) Стабильный аналит: чувствительные функциональные группы в аналите могут быть защищены дериватизацией для предотвращения разложения или изменения во время разделения и обнаружения .

► Тип производного лечения
Дериватизация в основном делится на два типа: дериватизация до колонны и дериватизация после колонны:

1) Предварительный вывод:
Перед тем, как аналит войдет в столбец, он химически реагирует с производными для получения производных .
Деривативы затем разделяют и обнаруживаются на столбце .
Дериватизация Procolumn имеет преимущества условий свободной реакции и легкой многоэтапной реакции, но она также может ввести примеси или потерять образцы .
2) Поступительное вывод столбца:
Аналиты сначала разделены на хроматографическом столбце, а затем химически реагируют с производными в ячейке производных .
Полученные производные затем вводятся в детектор для обнаружения .

Вывод постколона имеет преимущества хорошей воспроизводимости и меньших влиятельных факторов, но это требует дополнительных инструментов и оборудования .
► Примеры применения производной обработки
При извлечении и разделении естественных фармацевтических химических компонентов он в сочетании с технологией производной обработки может достичь следующих применений:

1) Улучшенная чувствительность обнаружения: например, при анализе аминокислот введение легко обнаруживаемых функциональных групп (таких как флуорофоры) посредством предварительной дериватизации может увеличить силу сигнала аминокислот на детекторе, тем самым улучшая чувствительность обнаружения.}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}}
2) Улучшить эффект разделения: для некоторых соединений с аналогичной полярностью или аналогичной структурой полярность может быть скорректирована с помощью дериватизационной обработки, так что эффект разделения на хроматографическом столбце можно улучшить . Например, в анализ флавоноидов может быть введена в различные группы.
3) защита чувствительных функциональных групп: для аналитов, содержащих чувствительные функциональные группы (такие как фенольный гидроксил, амино и т. Д. Во время разделения .